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发病加州鲈检出细胞肿大虹彩病毒

出处:利洋水产 作者: 水产养殖网 2017-10-18 13:19:00

广东佛山市顺德区伦教镇一加州鲈养殖池塘,面积8亩,平均水深2.5米,配备7台1.5kW的叶轮式增氧机(见图1)。2017年1月一次性投放加州鲈水花5万尾,6朝左右的鲫鱼8000尾,10朝左右的花鲢800尾,10朝左右的白鲢400尾。加州鲈在规格3两/尾之前投喂配合饲料,之后投喂冰鲜鱼。9月中旬平均规格8两/尾,每日投喂3餐,每天共投喂1000斤冰鲜鱼。
       
该池塘9月初开始发病,刚开始时每天死亡几尾,随后死亡量逐日增加。发病后外用碘制剂和苯扎溴铵等消毒剂消毒,内服各种抗菌药物效果均不明显。9月12日起吃料不好,死亡量开始增加,每天死亡160尾左右,截止9月14日,该塘共计死鱼约3000尾。
       
9月14日下午,药店技术员从该养殖池塘带回2尾病鱼,外观体表无明显病变,解剖可见肝脏出血、脾脏肿大、肾脏出血肿大。采取病鱼的肝脏、脾脏、肾脏组织用冰盒冷冻保存,做病毒检测。
       
9月15日上午9点到该养殖池塘调查,在池塘四周可见少量游水的病鱼,个别鱼侧身游水(见图2)。简易测试盒水质指标:pH值7.6、氨氮1.2mg/L、亚硝酸盐0.6mg/L,哈希溶氧仪测定水温30.2℃,溶解氧5.04mg/L。从塘边取3尾游水的病鱼,其中2尾鱼体表无明显病变,另外1尾鱼头部及一侧口腔溃烂(见图3)。解剖见病鱼鳃充血(见图4),肝脏充血、肿大发黑,脾脏肿大、发黑(见图5),肾脏充血、肿大(见图6)。分别从所取3尾病鱼的肝脏和肾脏中接种进行细菌分离培养,并取病鱼的肝脏、脾脏、肾脏组织分别用波恩氏液固定和冰盒冷冻保存,带回实验室做组织病理切片和病毒检测。
       
结果:利用实验室建立的(RT-)PCR检测方法进行检测,9月14日药店技术员带回的2尾病鱼弹状病毒(Siniperca chuatsi rhabdovirus,SCRV)和大口黑鲈虹彩病毒(Largemouth bass ranavirus,LMBV)呈阴性,其中1尾鱼细胞肿大属虹彩病毒(Red sea bream iridovirus,RSIV)呈阳性(见图7)。9月15日采集的3尾病毒均未分离出大量细菌(见图8),病毒检测结果显示3尾鱼弹状病毒(SCRV)和大口黑鲈虹彩病毒(LMBV)呈阴性,细胞肿大虹彩病毒(Red sea bream iridovirus,RSIV)扩增出与预扩增片段大小相符的目的条带(见图9),将目的条带进行测序比对,其序列与GenBank中细胞肿大虹彩病毒(RSIV)基因的序列同源性为99.6%,证实所取发病的加州鲈感染了细胞肿大虹彩病毒。组织病理切片显示:肝脏组织淤血,组织细胞空泡变性(见图10);脾脏组织淤血,可见诺卡氏菌结节性坏死灶(见图11);肾脏肾小球、肾小管萎缩,肾小管上皮变性、坏死,部分崩解,肾间组织细胞散在坏死(见图12)。
       
分析:1、细胞肿大虹彩病毒,主要感染鲈形目鱼类,之前我们从发病的海鲈、笋壳鱼、尖吻鲈、篮子鱼、斜带髭鲷、鳜(传染性脾肾坏死病毒)等多种鱼类都检测出阳性,主要以脾肾肿大、坏死和鳃丝等组织贫血、出血为主要症状,本病例从病理切片看病鱼也有诺卡氏菌感染,本病例发病和死亡是否由细胞肿大虹彩病毒引起,有待进一步调查。
       
2、细胞肿大病毒属虹彩病毒,引起组织特征性病理变化是内脏、鳃组织出现肿大细胞,本病例中组织病理切片未见肿大细胞,从病毒检测电泳结果来看,组织中病毒粒子的含量不高,可能尚处于早期感染阶段或水温条件等不适宜病毒大量复制有关。(利洋研究所 雷燕  利洋伦教店 张秋松 俞潇凌 提供2017.10.12)
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