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对虾养殖技术新思考-对虾白斑综合症和肝胰腺坏死症生态防控技术

2015-05-27 11:01:00  水产养殖网  出处:中国水产养殖网        浏览量: 5982 次 我要评论
  5月27日,第七届中国对虾产业发展研讨会在厦门君泰酒店召开,国家虾产业技术体系首席专家何建国做了《对虾养殖技术新思考——对虾白斑综合症和肝胰腺坏死症生态防控技术》专题报告,下面是报告全文。
 
  【作者介绍】

  何建国,男,49岁,博士,教授,博士生导师。 1990年在中山大学动物学专业获得博士学位,1994年任中山大学教授至今。 国家杰出青年科学基金获得者,“新世纪百千万人才工程”国家级人选,教育部“鱼类重要疾病免疫防制研究”创新团队带头人,广东省高校“千百十工程”第四批先进团队“水生经济动物病害控制”带头人,农业部渔业局水生动物防疫标准化技术工作组副组长、中国水产学会理事、广东省动物学会常务副理事长。为农业部“虾产业技术体系”首席科学家、国家公益性行业(农业)专项“对虾养殖管理信息系统建立与应用”首席科学家、科技部支撑计划“南海海水养殖产业升级关键技术与示范”项目牵头人。在国内外杂志发表论文 200 多篇,其中 SCI 收录论文 90 多篇。申请国家发明专利 40 多项,其中授权专利20 多项。

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对虾是全球性水产养殖种类,也是全球交易量最大的水产品(2011年,180万吨)。我国是全球对虾养殖产量第一大国,2012年产量为165 万吨,占全球养殖产量的40%。今天主要还是从生态和细菌的角度去,来告诉大家对虾养殖出了什么问题,以及怎么来进行预防。
首先来讲,对虾有两大疾病,一个是白斑综合症(WSS)和肝胰腺坏死症(HPNS)这是是制约全球对虾养殖产业发展的最主要障碍。

自1988年WSS爆发以来,困扰全球对虾养殖产业。在中国来讲,是在92年开始出现。在广东的粤东,从1993年到1998年,当时的损失很大,从原来的20多万吨减产到10万吨。当时在中国养殖的虾塘90%都是病虾,发病池塘对虾死亡率接近100%,年直接经济损失达30多亿。国内对虾养殖产业陷入了严重的困境,产量由世界第一跌至第六。

后来这种病症发现是肝胰腺坏死,也是近几年的事情。实际上,到目前为止我们认为这是一个生态因素引起的。而且我们也拿出了一整套的技术防控措施。

对于白斑综合症,现在在生产当中已经大量的使用。它在流行病学上实际是分为两个阶段,一个是个体感染期,虾塘水体中病毒潜伏感染对虾个体,潜伏感染个体之后转为急性感染。第二个群体感染。第一阶段得病的个体一定是死亡的,那么它通过什么在虾塘里面进行传播呢?主要是健康虾摄食死虾,导致疾病传播与爆发,最后对虾种群崩溃。

那么要如何去阻断这种传播?一个是靠技术,通过环境调控,阻止病毒从潜伏感染转为急性感染。另一个是消除他的感染途径,不让健康对虾摄食死亡对虾,切断疾病的传播途径。实际上就是这么两条。

WSS导致养殖对虾种群崩溃的根本原因是什么呢,一个就是集约化养殖,导致养殖生态系统种群单一,缺乏与健康对虾摄食死虾的优势竞争者。

那么由潜伏感染到急性感染与那些因素有关呢?
有三个方面,一个是对虾TOLL和IMD途径调控白斑综合症病毒(WSSV)复制,跟细菌的感染以及对虾的抗力有关(一个是抗病毒,一个是抗细菌),这里就是跟抗细菌的免疫途径有直接关系。对虾体内的病毒会借由抗细菌这一免疫途径,同时也能够激活弧菌等其他途径,一旦激活,就会导致TLR调控病毒的复制。也就是说,如果只是受到抗细菌病毒的影响,对虾不会从潜伏感染造成急性感染。

第二个跟环境有关,也就是环境的胁迫作用。导致的后果是对虾或是其他是生物是共性的东西,内质网胁迫的非折叠蛋白反应途径与白斑综合症复制的关系,内质网规则安排的急性增长。

第三个是对虾抗WSSV途径。WSSV感染试验中,重组LvCTL1对L. vannamei具有保护作用。

那么如何切断白斑综合症的传播?并不是对虾的抗应激能力越强,得白斑综合症的概率就越低。我们可以发现,如果降低对虾的抗应激能力,环境发生变化,对虾抗应激能力弱,它就很容易中毒,这样的虾反而不会发生白斑综合征。

如果对虾的免疫增强,反而会发生白斑综合征。也就是说,得了肝胰腺坏死症的虾,你很难说它准备感染白斑综合征,或者说,可以看感染了肝胰腺坏死症的虾比正常的虾的细菌含量还要少。这就是自然生态中的矛盾。

也即是白斑综合症是利用了病毒利用了对虾的先天性免疫来启动了它的物质,来达到感染的目的。这是它的聪明之处。

第二个怎么在虾塘内部来阻断白斑综合症的传播途径?现在主要的结论是,在虾塘中,只要有一个对虾感染了白斑综合症,有一条虾死亡,那么,就难免发生虾吃虾的问题,但如果是被其他的不敏感生物吃掉,而不是被其他健康虾吃掉,那就行了,不会从潜伏感染进入机型感染,这也就是我们所说的 生物防控。

生物防控基础
(1)健康对虾摄食死亡对虾是WSS传播的主要途径
(2)在对虾养殖生态系统中,引入鱼类作为摄食死亡对虾优势竞争者,阻断健康对虾摄食死亡对虾,切断WSS的传播途径。
(3)根据摄食能力、摄食方式、活动能力和生态适应性,筛选出18种鱼类,开展鱼类对健康对虾、患病对虾和死亡对虾摄食能力、摄食选择性等生物防控关键。

举个例子,在10平方米的水泥池当中,按5万尾的密度来访750尾健康虾,人工再放一尾1公斤的草鱼,再人工放50为感染了白斑综合症病毒的虾,是不会发生群体感染的。如果没有放草鱼,即便是放一尾受感染的虾,那么也会发生群体感染,最后750尾的健康虾,不会剩下多少。

从这里可以看出,生物防控的力量是非常的大的。当然,现在在我们国家,除了有些高位池,大部分的养殖都在用混养部分鱼来达到生物防控的目的。

为什么有时候没有效果呢?原来在台山养虾,是因为没有放鱼的习惯,要不放的量很少,一亩象征性放几条,要么放的是鱼苗。有个朋友说一亩放了200尾的草鱼苗,但是对抑制白斑综合症一点效果都没有,这是因为他放的是鱼苗。草鱼在半斤的时候口还没张开,没办法达到防控作用。在我们的技术手册当中,如果按照规定的规格、数量,再按配合适当的停料处理,不能说100%,但至少是99%是不会发生白斑综合症的,这个以前讲过,现在不多说了。

现在主要是讲正在发生的肝胰腺坏死,这个病的组织病理学谁都知道,不再赘述。

目前对于肝胰腺坏死病,大家的观点有很多,很多专家研究、实验的结果也都不太一样。

这种病症在中国发生的表现是,一般是对虾养殖到40-50天时,发生偷死。我就把它称之为肝胰腺坏死症。

那么到底是什么病菌导致的呢,实际上就是高致病的副溶血弧菌,这是国际上目前比较流行的看法。到底是不是,我们做了多年的工作,分别在中国广东省番禺、珠海、中山、江门、阳江、茂名、湛江、惠州、汕尾、河北省唐山、广西省、海南省等地采样,收集了很多不同的地方发病的虾塘都是数据。取“空肠空胃”等症状的172尾病虾的肝胰腺、肠道、血淋巴和患病仔虾进行细菌分离,分别涂布LB、TCBS、BHI等培养基并进行纯化,共收集1435株细菌。采用传统微生物学鉴定方法、16S rDNA基因扩增、BIOLOG Gen Ⅱ/Gen ⅢMicrostation自动微生物鉴定系统等方法,鉴定细菌941株,分别属于10个属,73种细菌。从它的血淋巴和肝胰腺、消化道可以观察到,尤其是血淋巴和肝胰腺。

对虾病毒病草鱼生物防控技术
① 适合盐度6以下养殖区;
② 适合对虾苗种密度低于10万尾/亩;
③ 对虾苗种养殖20~30天,每亩投放30~60尾,每尾1kg左右的草鱼。
④ 比照对虾养殖的正常管理方法,培好水后,投放25px左右的虾苗,每亩10万尾以下。由于草鱼在盐度大于6的水体中摄食能力较弱,所以选用草鱼的养殖水体的盐度在6以下范围内。如果养殖水体的盐度大于7.5,可用添加淡水的方法降低盐度,将盐度控制在上述范围内。适时投放草鱼。对虾养殖到20~30日左右,对虾病害暴发前投放草鱼。投放的草鱼数量不能少于30尾/亩,每尾1kg以上,并可根据放养虾苗的密度适当增加,但不能超过60尾/亩。

白斑综合症在我国养殖对虾发病率由90%下降到5%以下,基本消除了对虾白斑综合症对我国对虾养殖业的威胁。

爆发流行期(1991-1995);环境调控防控技术应用期(1995-2004);环境调控防控与生物防控集成技术应用期(2004-2012)

肝胰腺坏死病HPNS
国际上称为早期死亡综合症(EMS)/ 急性肝胰腺坏死症(AHPNS),我国对虾养殖者称为“偷死病”,我们称为肝胰腺坏死症(HPNS)。

2013年全球养殖对虾减产23%,泰国减产54%,我国减产17%,广东减产30%。养殖时间超过80天池塘的对虾HPNS发生率超过了80%,前中期发生HPNS单造养殖产量只有300斤/亩。年直接经济损失超过50亿元。

采用人工感染方式,用副溶血弧菌V1、苏云金芽孢杆菌Z7、V1+Z7混合菌分别注射感染对虾,在感染后6天全部死亡,死亡率100%,表现典型肝胰腺坏死症状。对照组死亡率为12%,没有肝胰腺坏死症状。

其中:

鉴定有副溶血弧菌的对虾51尾,占鉴定对虾总数的52.6%;
鉴定有蜡样芽胞杆菌的对虾27尾,占鉴定对虾总数的27.8%;
鉴定有霍乱弧菌的对虾23尾,占鉴定对虾总数的23.7%;
鉴定有嗜水气单胞菌的对虾19尾,占鉴定对虾总数的19.6%;
鉴定有苏云金芽胞杆菌的对虾17尾,占鉴定对虾总数的17.5%;
鉴定有金橙黄微小杆菌的对虾14尾,占鉴定对虾总数的14.4%;
其他细菌也分别在不同尾虾中检出。

证明:HPNS不是有单一某种细菌所导致
总的来说,从患病的肝胰腺坏死症的对虾当中,肝胰腺坏死并非是一种细菌感染的结果,也不是单一的副溶血弧菌感染,而是多种细菌共同感染的结果。

那么是不是病毒呢,我也做了大量的实验,针对对虾WSSV、IHHNV、MBV、BP、TSV、YHV、IMNV等11中病毒检测和人工感染,证明HPNS不是由病毒所致。

是不是跟环境有关?哪些环境因子是主因?实验表明,干胰腺坏死明显跟亚硝酸盐和氨氮有关系。发病的虾塘和不发病的虾塘,亚硝酸盐的上限有很大的差距,一旦超过阈值,很容易诱发肝胰腺坏死症。

采用的方法是:分别比较发病塘与没发病塘亚硝酸氮浓度最大值和平均值,通过单因素方差分析,P<0.05,差异显著。结果表明,亚硝酸氮与发病具有密切关系。根据结果分析得亚硝酸氮对发病的阈值为:163ug/L~259ug/L。达到或者超过阈值,认为很可能诱发对虾发病。

下面是停料。在我们实际养殖当中用的比较多的是停料。一旦停料,亚硝酸盐和氨氮值会急剧下降。这就是为什么很多时候在对虾、罗非鱼发病时,停料有效的原因。停料虽然不能减少细菌的发生,但是能够减少氨氮值。最终的结果是氨氮的急性胁迫。

还有就是藻毒素的影响。在藻类大量死亡的时候,发生氨氮的数量会上升到10倍以上,同时伴随着弧菌10倍的上升,极易发生感染。总而言之,它的直接原因是条件致病菌、有害理化因子和有毒藻类三类因子的影响。

最后是什么呢?实际上根本的原因就是系统紊乱。养殖生态系统紊乱,生态系统抗应激能力弱,不能有效控制条件致病菌和有毒藻类的发生。单位时间内养殖量超过了环境容纳量,有毒理化因子不能被消除。

除此之外,这个跟藻类的大量死亡产生的毒素有直接关系。氨氮的胁迫导致了对虾的免疫系统下降。

肝胰腺坏死症病因研究与分析
这种情况的发生有几种,一种是天气的急剧变化导致倒藻,氨氮胁迫。为什么早期的虾苗容易死亡呢,这是因为底层的氨氮升高,发生EMS。

第二种肝胰腺坏死症的发生则是跟细菌的集成有直接关系。
第三个,也是最重要的一个——有害理化因子,为什么在长期天气晴朗的情况下,还会发生偷死呢?如果你是在封闭的池塘中养殖,那么你的粪便就会产生有害物质,你最后是依靠三样东西来移除,一个是有益藻,一个是益生菌,一个是喷洒的其他内用的、外用的东西等,靠增强氧化作用来缓解。(一个优势藻的生长周期,从生长到集中期到平缓期,它平均的作用只有7天,第八天的时候,它已不再发挥作用。)

第四个是你的养殖量超过了缓解的承载,仅依靠有益藻类调控和益生菌调控已经不能维持健康生态系统,氨氮不断升高,PH持续下降,这是为什么目前对虾养殖难以超过80天的原因所在。

在生态系统中,在气候良好的情况下,由于藻类密度胁迫,藻类不再生长,失去了吸收营养盐的能力,此时的藻类应该是功能性较差,需要消毒清除老化藻类。

那为什么,我们有时候消毒也会诱发肝胰腺坏死症。我们做的实验,大家可以看看,如果你不加用其他东西仅仅是消毒,那么无论是虾体还是水体,那么条件致病因子在24小时内不降反升。消毒可以杀灭大部分的条件致病菌和老化的益生菌。但消毒对对虾而言是胁迫,对虾会产生应激,在消毒前需要使用Vc和葡萄糖酸钙处理。

都说停料的效果好,这是因为它能够解除氨氮的胁迫。氨氮的胁迫解除了。这也是为什么消毒早期的成果不是太显著,比如倒藻,消毒只是把藻类杀死了,反而提高氨氮的胁迫作用,细菌的胁迫作用。所以消毒的时候一定要加白芍粉,否则会起到反效果。

对养殖池塘条件致病菌、有毒藻类和有害理化因子检测结果分析,发现对虾养殖过程可以分为早期生态系统、中期生态系统和晚期生态系统。

实际上,对于对虾,我们怎么来维持生态系统的平衡呢?我把它分为三个阶段,第一个是早期生态系统。放虾苗前,要围三次水,但这不是盲目的做,等到早期的水体中的营养因子到满足藻类和其他浮游动物的生长,这个时候你才能够放虾苗。
因为早期生态系统(培水期和对虾大量摄食饲料期,约30天)池塘营养盐缺乏:不足于时有益藻类和益生菌持续调控生态系统的功能;不足于抑制条件致病菌和有毒藻类的产生;虾苗摄食底质腐败的有机物(死亡藻类、条件致病菌等)

这是对虾养殖早期发生HPNS的根本原因。
那么到了中期,是到了最可怕的阶段,如果不去消毒把蓝藻杀掉,养殖容易出问题。因为蓝藻是最容易死的,是有害藻。消毒剂的作用是把未大规模爆发的蓝藻杀掉,同时把老化藻类处理掉。,这是消毒最重要的两点。然后重新构建新的生态系统。如果不构建新的生态系统,那么就不足以供应你把虾持续养下去。

可以说,现在又80%甚至90%的对虾发病,往往就是生态系统调控的问题。到了后期,营养盐的输入大于有益藻类吸收和益生菌的转化能力:有益藻类和益生菌作用达到最大值;仅依靠有益藻类调控和益生菌调控已经不能维持健康生态系统;有害理化因子升高。

有没有办法能够控制养殖不超过环境的承载?比如控制氨氮、亚硝酸盐这些胁迫因子。到了这个时候,已经差不多是尽头了,没有什么办法能够处理。这也是为什么目前对虾养殖难以超过80天的原因所在。

至于不同的品种我就不讲了,现在我要讲的是我们做的一个养殖试验,

2014年第一造,在广东和海南选择三个地点进行了技术示范,共118口池塘,养殖时间超过90天,114口池塘养殖成功,养殖成功率超过94%。是封闭式养殖,放不了水,。同期同区域养殖对虾超过90天成功率不超过30%。
在养殖期间,经历过台风,暴雨,在这些天气前后,没有一口塘发生或倒藻。那么怎么才能做到这步,我们首先看看藻类,如何判定藻类和益生菌老化。

水体起泡沫,藻类大量死亡,那就麻烦了。昼夜水体pH变化小于0.6,证明藻类的功能不太好。如果早晨在池塘下风口可以闻到异味,岸基物体倒影不清晰,显微镜观察,藻类活动力弱,那么这个时候就说明藻类老化,要杀藻。

要怎么维持这一塘的水不产生问题?我们的措施是这样的。如果在天气变化之前,要关注4天的天气情况。如果天气晴朗,就要在上一次消毒调水8天后,开始做水处理。也有个例,如果你的空滤低于25厘米,那么也要做处理,因为这个时候很有可能是蓝藻。因为蓝藻除了吸收氮、磷之外,也吸收原核生物,此外,它对光源的获取能力非常强,如果的你的透密度太低,在与光源的竞争当中,蓝藻很容易占据上风,其他藻类跑到下面去,容易发生死亡。

那么在台风暴雨的前四天,具体要做什么?
第一天,要肥水,让一些有益藻类进入指数生长,同时,要把饲料集中发酵。(一般需要36小时至48小时)

第二天,要做应急处理,消毒,底质改良。为什么这么做。应急处理2小时后进行消毒,6-8小时开始底质改良,把老化有益菌、蓝藻杀掉。 第三天,已经过了48小时,这时候用发酵好的饲料进行培水和培养益生菌,第四天新生藻类和益生菌大量繁生,生态系统具有比较强的抗胁迫能力。配合减料或停料。

关于养殖容纳量
养殖对虾需要上市规格,需要时间;

养殖对虾密度和对虾品种决定了每天的营养盐输入量;

藻类和益生菌最大功能决定了对虾粪便等所产生的营养盐量;

因此,养殖的关键是要使中期生态系统不要过早的进入晚期生态系统,这与种苗密度、品种、养殖管理有关。

因此固定的养殖模式养殖容纳量是一个相对定量,一般情况下,封闭式养殖模式(养殖期只进水不排水),养殖90-100天产量约1000斤/亩/造。每交换1池塘水,养殖凡纳滨对虾会增加约300斤/亩。

关于生长快的种苗与普通种苗
相同密度,养殖至中、后期(40-50天)营养盐的投入量生长快种苗池塘约是生长慢种苗池塘的2倍,中期生态系统会过早的进入晚期生态系统。

如在封闭式养殖模式中,投放5万尾虾苗/亩,养殖50左右天投喂饵料约800-1000斤,而普通虾苗约300斤。

生长快的对虾密度大,中期生态系统的稳定很难维持。

关于停料和减料
在封闭式养殖模式中,养殖100天,完全停料14天,每天投喂1次23天,投喂和2次9天,停料和减料时间46天,一天正常投喂54天。

一次停料3天,对对虾生长没有太大的影响

停料和减料的原则
1、大雨停料
2、阴天和小雨减料
3、降温停料或减料
4、pH变化低于0.6停料或减料
5、发生肝胰腺坏死症停料
6、水体有泡沫或有异味
7、倒藻
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