育苗朋友请看：无痛无创快速便捷的育苗技术可极大提高鱼类孵化效率 |
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2017-06-09 22:43:00 水产养殖网 出处：GAA/水产前沿编译
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编译/水产前沿 李钒
来源：GAA
通常通过主观的判断和人工的方法确定雌性斑点叉尾鮰是否已经性成熟
大多数鱼类在自然条件下不容易繁殖，因为繁殖所需的环境条件尚未得到充分了解。为了克服水产养殖品种在自然条件下的产卵困难，通常将激素用于妊娠雌鱼，以诱导和最终同步卵母细胞的成熟和卵的释放，也就是说用激素诱导鱼类产卵成功的关键就是要确定妊娠雌性是否已经完全性成熟。
50多年前，美国的鲶鱼养殖业的育苗依赖于通过池塘自然产卵生产的鲶鱼。在过去十年中，由于用雌性斑点叉尾鮰和雄性蓝鲶鱼杂交出来的品种具有生长速度快，成活率高，耐受性和抗病力强，加工出肉率高的优势，已经大面积用于生产。生产杂交鲶鱼需要用激素诱导雌性斑点叉尾鮰排卵，人工分离卵，再用蓝鲶鱼精子溶液对卵子进行授精，然后在孵化场孵化。
检查雌性斑点叉尾鮰的性腺成熟程度
传统判断斑点叉尾鮰性腺成熟度的方法
同一组斑点叉尾鮰中性腺的成熟程度不同，因此需要判断和分级具有优越或高级性成熟度的雌性斑点叉尾鮰，从而使产卵和孵化鱼苗顺利进行。如果斑点叉尾鮰性腺不够成熟，就需要经常地处理以确定成熟期，并选择适当成熟的鱼进行激素诱导排卵。
重复处理成熟鱼类是非常费时费力的，而且会经常导致压力、伤害、疾病，表现为死亡率升高。目前尚不存在客观地判断斑点叉尾鮰性成熟度的快速、非侵入性的方法。传统的方法是通过视觉观察二次性特征和腹部丰满度来判断鱼的性成熟度，斑点叉尾鮰的性成熟度主观上分为1-5级：
阶段1.腹部较平，生殖器开口较小并显浅红色；
阶段2.腹部稍微丰满，较小的生殖器开口并带浅红色；
阶段3.触诊时腹部感觉丰满，较小的生殖器开口并带有粉红色；
阶段4.腹部较大，较小的生殖器开口并带有粉红色；
阶段5.腹部充分膨胀且柔软，生殖器开口大而突出，并显粉红色
将池塘中的亲鱼带到实验室进行数据采集
性腺成熟度一般由性腺指数、卵母细胞大小、卵母细胞中性腺泡的位置、卵巢切片组织学、类固醇激素的血浆浓度和卵巢超声成像确定。此类方法是主观性的，耗时耗力，具有侵入性和不可靠的实际应用方法。
测试便携式近红外光谱（NIRS）仪
虽然生产杂交苗的效率随着时间的推移已经大大提高了，但结果仍然不一致，那有没有判断鲶鱼性成熟快速、可靠和无创的方法呢？因此，在我们的研究中，我们评估了近红外光谱（NIRS）仪客观判断鲶鱼性成熟期的可行性。
近红外光谱仪是一种使用长波长光线的选择吸光度鉴定不同有机化合物的技术。例如，近红外光谱仪用于基于蛋白质和脂肪含量和组成的差异来评估肉和鱼片的质量。因此，我们开始研究，看是否可以使用近红外光谱仪来确定鲶鱼的性成熟期。
现场的近红外光谱仪具有900-1650nm的光谱范围，约6mm分辨率，2mm×4mm采样面积，每次测量扫描100次，每次测量有5秒仪器分析时间，重200g。该仪器与光源、光谱仪发动机和电子设备集成在防水外壳中，适用于常规现场应用。
在性成熟和产卵期间，所有鱼类都会发生剧烈的生物化学变化，因为营养物质被调动以提供卵发育和产卵所需的能量和资源。如果可以鉴定和测量这些生物化学的变化，就可以客观地识别适合于激素诱导产卵的完全性成熟的雌性鲶鱼。
先用软质网固定住斑点叉尾鮰，再用便携式近红外光谱仪扫描鱼的腹部
首先用手持便携式近红外光谱仪对每条鱼进行4次腹部扫描，每次扫描需要约5秒钟就能完成。然后记录反射光的复谱，数据被数学处理后，通过高度相关的光谱数据开发模型，与性成熟度视觉评分标准进行对比。从31条雌性斑点叉尾鮰的性成熟评分可以看出，视力评分范围从3-5（5是“最成熟的”），而使用近红外光谱数据模型的平均排名分数相应为3.25、4.25和4.75，结果更为准确。（下表）。
根据次生性特征和腹部丰满度分期的斑点叉尾鮰的成熟阶段的平均排名
该初步研究表明，近红外光谱根据雌性亲鱼的成熟度的变化而变化，并且可以使用近红外光谱数据中的变化来开发与视觉评估的雌性成熟度相关的数学模型。下一步将是使用两种方法来评估性成熟度，并查看哪种方法能最准确地预测产卵量、孵化率和鱼苗存活率。
展望
用于评估雌性斑点叉尾鮰成熟度的便携式近红外光谱仪是非侵入性的、快速的，简单的和可重复的。该仪器坚固耐用，符合人体工程学设计，适合现场应用。虽然价格相对较贵（约合20000美元），但几家企业可以一起购买共享仪器以降低成本。
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